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血細胞分析儀檢測方法之多角度偏振光激光散射技術
日期【2017-01-16 08:55】 共閱:【】次

血球試劑小編為您介紹下血細胞分析儀檢測方法之多角度偏振光激光散射技術。

美國雅培公司(ABBOTT)推出的血細胞分析儀,在白細胞分類中采用獨特的多角度偏振光散射(MAPSS)技術,其所生產的血細胞計數儀從CELL-DYN 3000,3200,3500,3700,4000,以及Sapphire(藍寶石),在白細胞分類上均采用了MAPSS技術。該技術基本原理是細胞在激光束的照射下,在多個角度都產生散射光,儀器在四個角度的四個檢測器將接收到的相應的散射光信號,然後經過微處理器分析處理,將各類細胞安置在散點圖上的相應位置,並計算出白細胞分類結果。

多角度偏振光散射白細胞分類技術(Multi—Angle Polatised Scatter Separation of white cell,MAPSS)其原理是一定體積的全血標本用鞘流液按適當比例稀釋。其白細胞內部結構近似於自然狀態,因嗜堿性粒細胞顆粒具有吸濕的特性,所以嗜堿性粒細胞的結構有輕微改變。紅細胞內部的滲透壓高於鞘液滲透壓而發生改變,紅細胞內的血紅蛋白從細胞內遊離出來,而鞘液內的水分進入紅細胞中,細胞膜的結構仍然完整,但此時的紅細胞折光指數與鞘液的相同,故紅細胞不幹擾白細胞檢測。在鞘流係統的作用下,樣本被集中為一個直徑30μm的小股液流,該液流將稀釋的血細胞單個排列,然後通過激光束,激光照射於細胞上,在各個方向都有其散射光出現。

1) 0°為前向角散射光,可粗略地測定細胞大小;

2) 10°為狹角散射光,可測細胞結構及其複雜性的相對特征;

3) 90°垂直光散射,主要對細胞內部顆粒和細胞成分進行測量。

4) 90°為消偏振光散射,基於顆粒可以將垂直角度的偏振激光消偏振的特性,將嗜酸細胞從中性粒細胞和其它細胞中分離出來。

5) 這四個角度同時對單個白細胞進行測量和分析後,即可將白細胞劃分為嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、嗜堿性粒細胞、淋巴細胞和單核細胞5種。ABBOTT的五分類法定量很有意思,不用傳統的體積定量,而是采用數量定量,每次計數時完成10000個細胞測定即停止。

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